DBCO(二苯基环辛炔)、PEG(聚乙二醇)和HRP(辣根过氧化物酶)
DBCO-PEG-HRP,即二苯基环辛炔-聚乙二醇-辣根过氧化物酶,是一种结合生物活性酶与高效反应基团的复合试剂。其结构由三部分组成:DBCO(二苯基环辛炔)、PEG(聚乙二醇)和HRP(辣根过氧化物酶)。DBCO作为点击化学中的明星基团,可通过无铜催化的1,3-偶极环加成反应与叠氮化物迅速结合,形成稳定的三唑键。PEG作为亲水性连接臂,不仅增强了HRP的水溶性,还显著提高了生物相容性,使其在复杂生物体系中保持稳定性和活性。
物理性质与储存条件
DBCO-PEG-HRP通常呈白色或类白色固体粉末,溶解度方面表现出明显的亲脂性,易溶于DMF、DMSO、二氯甲烷等有机溶剂,但极难溶于水。储存时需严格控制在-20℃以下,避免反复冻融,以确保其反应活性。HRP的酶活性在pH 5左右达到最佳,这一特性使其在酸性条件下的生物反应中更具优势。
应用拓展
在生物偶联领域,DBCO-PEG-HRP被广泛应用于抗体-药物偶联(ADC)、蛋白质标记及纳米材料功能化。例如,通过DBCO与叠氮修饰的抗体反应,可定向偶联HRP至靶向分子表面,实现信号放大或药物精准递送。此外,在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,DBCO-PEG-HRP作为高灵敏标记物,可显著提升检测信号的强度和特异性。