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技术文章

药物荧光标记:Paclitaxel-FITC 绿色荧光素标记紫杉醇

   Paclitaxel-FITC 绿色荧光素标记紫杉醇,其中紫杉醇是一种天然药物,是一种可以促进微血管聚合和稳定已聚微管的药物,较多用于多种类型的实体瘤癌症。作为一个具有活性的二萜生物碱类化合物,分子式为C47H51NO14,相对分子质量853.91。为白色结晶性粉末,无臭,无味,难溶于水,易溶于甲醇、乙腈、氯仿、丙酮等有机溶剂。

   大部分文献中提到的是FTTC荧光标记的原理是利用异硫氰基与氨基形成共价结合,对于结构中无氨基的物质需要先衍生反应后再标记,如无氨基的多糖、药物需要先与酪胺偶联产生氨基后再与FTTC反应.由于紫杉醇的结构中没有氨基,无法直接标记,大部分科研人员使用谷氨酸作为linker,先合成谷氨酸–紫杉醇复合物,再与FTTC反应,最终得到紫杉醇–谷氨酸-FTTC复合物

    异硫氰酸酯能与蛋白质或抗体的伯胺基发生反应,带有NH2基团的小分子药物均可用FITC进行荧光标记。异硫氰酸荧光素FITC常作为荧光探针应用于制备分子生物学或糖类聚合物的结合物分子,例如葡聚糖、壳聚糖、活性基团等。

    FITC的碳酰胺键可与抗体蛋白上的赖氨酸氨基结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。抗体分子最多可标记15~20个FITC分子。标记的抗体仍能保持与相应抗原结合的能力,在荧光源紫外线或蓝紫光的刺激下产生黄绿色荧光,通过荧光显微镜观察或使用流细胞仪进行分析,从而定性、定位或定量抗原。

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