FITC-胆红素，FITC-Bilirubin，检测与应用

FITC - 胆红素凭借荧光示踪与生物活性的双重优势，在生物医学研究中应用广泛，其检测方法围绕荧光特性设计，兼具高灵敏度与特异性。

一、核心应用场景

1. 胆红素代谢机制研究

用于追踪胆红素在体内的吸收、转运、代谢及排泄路径，通过荧光成像直观观察其在肝脏、肠道、血液等组织中的分布与动态变化，助力解析肝脏代谢相关的生理与病理机制。

可用于研究黄疸相关疾病的发病机制，观察异常状态下胆红素的代谢受阻位点，为疾病诊断提供理论依据。

2. 生物样本中胆红素检测

作为荧光探针用于体外生物样本（如血清、尿液、细胞培养液）中胆红素的定量检测，借助荧光信号强度与胆红素浓度的相关性，实现快速、精准的含量分析。

适用于临床前研究中肝脏功能评估，通过检测样本中胆红素水平变化，反映肝脏代谢功能状态。

3. 靶向结合与相互作用研究

用于探究胆红素与体内蛋白质（如白蛋白）、受体或细胞的特异性结合能力，通过荧光定位观察结合位点，分析相互作用的亲和力与特异性。

可用于筛选影响胆红素结合或代谢的药物分子，观察药物对胆红素 - 靶点相互作用的调控效果。

4. 细胞水平的生物活性研究

用于细胞实验中，追踪胆红素进入细胞的过程、胞内分布及代谢去向，结合荧光成像技术观察其在细胞内的作用部位。

可辅助研究胆红素的抗氧化、抗炎等生物活性，通过荧光信号变化间接反映其在细胞内的功能发挥情况。

二、常用检测方法

1. 荧光分光光度法

利用 FITC 的特征荧光（激发波长约 490nm，发射波长约 520nm），通过荧光分光光度计检测样品的荧光强度，根据标准曲线计算胆红素的浓度。

优势是操作简便、灵敏度高，适用于大量样本的快速定量分析，广泛应用于体外生物样本检测。

2. 荧光显微镜成像法

适用于细胞或组织样本的定性与定位分析，将负载 FITC - 胆红素的细胞或组织切片置于荧光显微镜下，激发后观察绿色荧光的分布的位置，直观呈现胆红素的靶向结合或分布情况。

可结合共聚焦显微镜实现细胞内的精准定位，清晰观察胆红素在细胞器层面的分布。

3. 流式细胞术

用于分析细胞对胆红素的摄取效率，将 FITC - 胆红素与细胞共孵育后，通过流式细胞仪检测单个细胞的荧光强度，统计阳性细胞比例及平均荧光强度，反映细胞摄取能力的差异。

适用于筛选影响细胞摄取胆红素的因素，或比较不同细胞系对胆红素的摄取特性。

4. 高效液相色谱 - 荧光检测法（HPLC-FLD）

结合 HPLC 的分离能力与荧光检测的高灵敏度，先通过色谱柱分离样本中的 FITC - 胆红素与其他杂质，再通过荧光检测器检测目标峰的荧光强度，实现高特异性定量。

适用于复杂生物样本（如组织匀浆）中胆红素的精准定量，有效避免杂质干扰。