FITC-螺旋藻多糖,异硫氰酸荧光素FITC-螺旋藻多糖,FITC-SP,监测HeLa细胞内的内涵体逃逸过程
中文名称:FITC-螺旋藻多糖
英文名称:FITC-SP
FITC-螺旋藻多糖(FITC-Spirulina polysaccharides,简称FITC-SP)是一种将绿色荧光素异硫氰酸酯(Fluorescein isothiocyanate, FITC)共价偶联至螺旋藻多糖(Spirulan)上的高分子荧光探针。其化学本质为多糖-荧光染料缀合物,兼具天然多糖的生物活性与FITC的示踪性能,分子量通常在10–30 kDa区间,具体取决于提取批次与纯化工艺。
螺旋藻多糖主链由α/β-1→3、1→4-糖苷键连接的葡萄糖、甘露糖、半乳糖及葡萄糖醛酸组成,硫酸基与羧酸基团赋予其负电性;FITC通过异硫氰酸酯基团与多糖羟基发生亲核取代,形成稳定硫脲键,标记率可达每100个糖残基含1–2个荧光团。产物呈黄绿色粉末,易溶于PBS或生理盐水,最大激发/发射波长为488/520 nm,荧光量子产率约0.3,在pH 7–9范围内荧光强度最稳定,且对温度(≤60 °C)与蛋白酶具有一定耐受性。
功能层面,FITC-SP继承螺旋藻多糖的免疫增强、抗氧化与抗凝血活性,同时获得实时示踪能力。科研级产品已被用于:①巨噬细胞摄取动力学——通过流式细胞术量化不同时间点胞内荧光强度,证实SP通过网格蛋白介导的内吞入胞;②口服药物递送——将FITC-SP与壳聚糖共混微球包埋胰岛素,大鼠肠道荧光成像显示微球在回肠段滞留时间延长2.3倍,显著提高降糖生物利用度;③基因治疗载体——FITC-SP与PEI复合形成100 nm左右的纳米粒,可在激光共聚焦下观察其在HeLa细胞内的内涵体逃逸过程,为多糖-基因递送系统的结构优化提供可视化依据。
在医药前体开发领域,FITC-SP作为“糖-药”偶联中间体,可通过点击化学或还原胺化引入醛基、炔基等手柄,进一步连接紫杉醇、阿霉素等小分子,实现多糖主动靶向与荧光监控一体化;其工艺路线温和(室温、水相)、产率>80%,适合放大生产。未来,基于FITC-SP的荧光-治疗双功能缀合物有望成为肿瘤免疫协同治疗及肠道微生态调控研究的重要工具分子。



