为华课堂:DBCO-PEG600-NHS / 二苯并环辛炔 PEG600 琥珀酰亚胺酯 / 无铜点击化学双功能交联试剂
双功能分子结构基础
该试剂为双活性基团 PEG 交联衍生物,分子由三部分共价串联而成,一端 DBCO 二苯并环辛炔应变炔基团,中间分子量 600 的亲水 PEG 柔性间隔链,另一端 NHS 琥珀酰亚胺活性酯基团。PEG600 短链提升整体水溶性,削弱两端活性基团空间位阻,避免两种反应互相干扰。DBCO 与 NHS 分属两类独立反应活性位点,可分步完成两类生物分子的共价偶联,实现生物正交标记串联反应。
两类活性基团反应原理
NHS 活性酯基团可在中性温和缓冲环境下,与多肽、蛋白、抗体表面伯氨基发生亲核取代,形成稳定酰胺共价键,反应条件温和,不会破坏生物大分子空间构象。DBCO 基团为无铜点击化学核心单元,无需铜离子催化,常温中性环境下与叠氮修饰分子发生环加成反应,生成稳定三唑环状连接结构,反应特异性高,体系内其他氨基、羟基等官能团无副反应。PEG600 链调节分子空间距离,减少标记后分子空间折叠带来的功能抑制。
主流科研应用场景
分步生物正交标记为核心用途,先通过 NHS 端修饰氨基类生物分子,再利用 DBCO 端连接叠氮标记探针,实现两步特异性偶联。其次用于纳米材料表面改性,修饰氨基纳米颗粒,赋予材料无铜点击反应结合位点,构建多功能纳米探针。同时用于核酸、多肽交联组装,构建多组分复合生物探针,适配荧光成像、质谱示踪、生物芯片等多类检测平台。
储存与偶联操作规范
活性酯基团遇水易水解失活,长期储存需密封低温干燥隔绝水汽。配置工作液现配现用,含水缓冲体系内缩短反应时长,避免 NHS 水解损耗。氨基偶联阶段控制 pH 在中性区间,强碱会加速活性酯分解;点击反应阶段无需金属离子,避光常温孵育即可完成,反应后透析去除未反应游离试剂。
本产品仅面向科学研究使用,任何情况下均不得用于人体实验、临床诊断、临床治疗及其他非科研活动。
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