endo-BCN-PEG-amine，内酰胺环己烯二酮-聚乙二醇2000-氨基，NH2-endo-BCN-PEG2000

名称与化学结构

endo-BCN-PEG2000-NH2（中文名：内酰胺环己烯二酮-聚乙二醇2000-氨基）是一种基于环辛炔衍生物的杂双功能连接剂。其分子结构由三部分组成：

endo-BCN基团：内酰胺环己烯二酮结构，具有高环张力，可无需铜催化剂与叠氮基（-N₃）发生应变促进的叠氮-炔环加成反应（SPAAC），形成稳定三唑环。

PEG2000链：分子量约2000的聚乙二醇，提供水溶性、生物相容性及空间隔离作用，减少非特异性蛋白吸附。

氨基端（-NH₂）：高反应性官能团，可与羧基（-COOH）、活性酯（如NHS酯）等通过酰胺键共价连接生物分子。

功能与应用

靶向纳米载体构建：
通过DSPE-PEG-endo-BCN结构（二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-endo-BCN），将叠氮基化药物或配体偶联至脂质体表面，实现靶向递送。例如，与叠氮基修饰的抗体结合后，可特异性识别肿瘤细胞表面抗原，提升药物富集效率。

生物正交标记：
在活细胞或体内环境中，氨基端可连接荧光染料（如FITC、Cy5），叠氮端与细胞表面糖蛋白反应，实现无损标记。此技术已用于细胞追踪及肿瘤成像研究。

蛋白与多肽修饰：
通过氨基端与蛋白N端或赖氨酸残基的羧基反应，结合endo-BCN端与叠氮基化聚乙二醇的偶联，可构建长循环蛋白药物。

实验连接手段

SPAAC反应是核心连接方式。例如，将含叠氮基的荧光探针（如DiR-N₃）与endo-BCN-PEG2000-NH2在缓冲液中混合，室温下1小时内即可完成偶联，产率>90%。氨基端与羧基的反应则需活化剂（如EDC/HATU）催化，形成酰胺键。

特性优势

生物相容性：PEG链提供“隐形效应”，延长体内循环时间。

反应特异性：SPAAC无需金属催化剂，避免生物分子损伤。

模块化设计：可灵活替换末端官能团（如羧基、马来酰亚胺），适配不同应用场景。