FITC-谷氨酸,荧光素-谷氨酸,异硫氰酸-L-谷氨酸,Glutamic acid-FITC
FITC-谷氨酸(FITC-L-Glutamic acid)是由异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate,FITC)与L-谷氨酸(L-Glutamic acid)通过共价键结合形成的荧光标记化合物。其化学本质为FITC的异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与谷氨酸的α-氨基(-NH₂)发生亲核加成反应,生成硫脲键(-NH-CO-N=C=S),形成稳定的标记产物。
化学结构与物理特性
L-谷氨酸分子式为C₅H₉NO₄,分子量147.13,含两个羧基(-COOH)和一个α-氨基,呈酸性(等电点3.22)。FITC分子量389.38,具有强绿色荧光特性(激发波长494 nm,发射波长521 nm),荧光量子产率约12%。二者结合后,FITC-谷氨酸继承了荧光特性,同时因谷氨酸的天然生物相容性,成为理想的生物标记工具。其物理形态为白色至淡黄色粉末,需在-20℃以下干燥保存以防止荧光淬灭。
功能与应用领域
神经科学研究
作为中枢神经系统主要兴奋性神经递质谷氨酸的荧光探针,FITC-谷氨酸可实时追踪突触传递过程。例如,在海马神经元中,通过全内反射荧光显微镜(TIRFM)观察发现,10Hz电刺激下突触后树突棘内荧光强度脉冲式升高,与微型兴奋性突触后电流(mEPSC)频率同步,揭示谷氨酸释放与神经信号转导的动态关联。在阿尔茨海默病模型中,侧脑室注射后海马区荧光斑点数量增加3.2倍,提示谷氨酸循环障碍。
药物筛选与开发
以HEK293细胞系表达的GluN2B受体为模型,FITC-谷氨酸的荧光强度变化可筛选NMDA受体拮抗剂。实验显示,10μM的ifenprodil可使荧光信号降低78%,为抗癫痫药物开发提供高效筛选平台。
生物传感器构建
结合碳纳米管开发的纳米传感器,在癫痫模型大鼠脑脊液中,传感器荧光淬灭速率与谷氨酸浓度呈负相关(R²=0.94),实现实时监测。
细胞成像与分子探测
通过荧光显微镜观察细胞内谷氨酸分布,研究其参与蛋白质合成、能量代谢等过程。例如,标记与谷氨酸代谢相关的酶,分析其在细胞内的定位与活性变化。
实验反应与制备
FITC-谷氨酸的合成需在pH 8.0-9.0的弱碱性条件下进行,以避免谷氨酸侧链降解。反应后通过高效液相色谱(HPLC)纯化,标记效率可达95%以上。实验中需严格控制温度与反应时间,避免未结合FITC的残留。



